❶ 请问LAMP的非特异扩增主要来源有哪些,4对引物6个区域还是不能保证非特异扩增的消失
1) 引物间的二级结构
2) 靶基因的选择,靶基因序列特异性不高,引物可能与其他位点结合产生非特异扩增
3) 反应体系中某些组分如镁离子、聚合酶等浓度不当会引起非特异扩增
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❷ 转基因食品的检测方法有哪些各有什么优缺点
目前转基因成分的检测方法主要有ELISA(酶联免疫吸附法)和侧向流动免疫测定法、普通聚合酶链式反应(PCR)的优缺点、实时荧光定量PCR(qPCR)、恒温荧光PCR检测方法等。
ELISA(酶联免疫吸附法)
ELISA具备了酶反应的高灵敏度和抗原抗体反应的特异性,具有简便、快速、费用低等特点,但易出现本底过高的问题,且只能检测目的蛋白抗原性没有明显变化的粗加工产品。直接法和双抗夹心法都要制备特异的酶标抗体,制备方法较繁琐,且一种酶标抗体只能检测一种蛋白,而适用于间接法的酶标抗抗体已有商品出售。一种转基因蛋白的检测试剂盒是否能在表达相同外源蛋白的不同植物之间通用还要进行试验。
侧向流动免疫测定法:
“侧流”型免疫测定是最近15年发展起来的,该方法之前主要用于医学领域。与ELISA相似,这种测定方法也是基于三明治夹心式技术原理,但该方法是在一种固相支持物上而不是在管子里进行,标记的抗原-抗体复合物侧向迁移,直至遇到在一种固定表面上的抗体。目前市场上已出现了用于侧向流动免疫测定并能用于野外测试的试剂盒。与DNA为基础的检测方法相比,该方法的样品处理简单。由于目标蛋白一般是水溶的且抗体具有高度专一性,因此检测样品仅需要初步处理便能达到测试的要求,具有快速、简便、适合野外操作等优点。侧向流动免疫测定试纸条是一种很快速简便的定性检测方法,将试纸条放在待测样品抽提物中,5~10分钟就可得出结果,不需要特殊仪器和熟练技能。但一种试纸条只能检测一种蛋白质,且只能检测有无存在外源蛋白而不能区分具体的转基因品种。侧向流动免疫测定方法是定性或是半定量。按照合适的采样步骤,可以在给定的一批样品中以99%的置信水平检测出少于0.15%的转基因成分。
普通聚合酶链式反应(PCR)的优缺点
优点:
1)准确度较高
2)灵敏度高
3)价格低
缺点:
1)操作复杂需要一定的专业背景
2)电泳时使用的染料对人体有一定危害
3)只能检测一个指标
实时荧光定量PCR(qPCR)的优缺点
优点
1)灵敏度高
2)准确度高
3)高通量
4)可以实现实时监控
5)可以实现定量判断
缺点
1)价格高昂
2)操作复杂
3)配套产品少
4)维护费用高
恒温荧光PCR检测方法:
恒温PCR技术的特点可以概括为比PCR更准确、快速、易于实现。因实现恒温扩增,特殊的引物设计,使得检测更准确;无变性、退火等环节,全过程均在进行DNA片段的复制,没有时间损耗,使检测更快速;无热循环需求,设备简单,更易于推广应用。为PCR技术推广应用创造了全新的空间。目前主流的实时恒温荧光PCR仪有广州迪澳生物Deou—308C恒温荧光检测仪、3M Molecular Detection System、Optigene Genie II 和 Genie III、Qiagen TuberScaner II、Envirologix DNAble等。
❸ 石磊的教育与工作经历
1981年9月-1985年6月 中国 河北大学生物系微生物及生化专业学士
1996年1月-1997年3月 日本 日本国立冈山大学药学院生物调节科学专业研究生
1997年4月-2000年3月 日本 日本国立冈山大学药学院生物调节科学专业博士
1985年8月1995年12月河北省疾病预防控制中心 传染病防治科 主管
1985.08 - 1995.12: 河北省疾病预防控制中心 传染病防治科 主管
2000.04 - 2000.09: 日本冈山大学药学部 研究员
2000.10-2003.03: 日本人类科学财团 研究员
2000.10 - 2001.03:日本国立国际医疗中心 研究员
2001.04起: 日本大阪府立大学大学院 研究员
2003.05起: 华南理工大学轻工与食品学院 教授,博导。
2008.06起:广州迪澳生物科技有限公司 董事长 首席科学家。
2010.06起:肉食品安全生产技术国家重点实验室 主任
❹ 假牛肉、假羊肉等假肉检测的方法和设备有哪些怎么做
假肉是通过添加了化学物质或进行一定的人工处理,然后改变了原本肉的纹理、质感、颜色等,使便宜的肉充当昂贵的肉,例如猪肉添加牛肉膏充当牛肉卖、鸭肉经过人工处理充当羊肉卖等等。这种改变很难用检测肉类质量的仪器检测出来,因为肉质检测一般是检测系水力(即有无注水)、新鲜度、PH值等,因此假肉的检测其实是属于动物源性检测,判断这块肉的来源是某一种动物。动物源性检测是分子水平上的基因检测,用PCR的方法检测肉类的基因,十分精确地判断出来自哪一种动物,所以需要用到PCR仪及配套的试剂盒。目前国内有家叫广州迪澳生物的公司有这种动物源性检测的仪器卖。
❺ SN/T 3767-2014 出口食品中转基因成分环介导等温扩增(LAMP)检测方法
参与起草和制定的单位有:中华人民共和国广东出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局、 中华人民共和国珠海出入境检验检疫局、 中国检验检疫科学研究院、 中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、 中华人民共和国天津出入境检验检疫局、 中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、 中华人民共和国福建出入境检验检疫局、 中华人民共和国厦门出入境检验检疫局、 中华人民共和国吉林出入境检验检疫局、 中华人民共和国汕头出入境检验检疫局、仲恺农业工程学院、广州迪澳生物科技有限公司。
❻ deaou-308C是国产的还是进口的
明确告诉你,食品安全封闭型分子检测设备deaou-308C是广州迪澳生物科技有限公司出品的。地倒的国货,但科技水平不差。